Apprendimento delle tecniche sperimentali per l'investigazione ottica dei sistemi viventi.
Prerequisiti
Laurea triennale
Metodi Didattici
Lezioni frontali ed esperienze di laboratorio
Modalità di verifica apprendimento
Esame Orale con discussione delle relazioni per l'attività di laboratorio volto ad accertare le conoscenze fondamentali acquisite e la capacità di lavoro in un laboratorio di ricerca.Le relazioni delle attività di laboratorio costituiranno elemento fondamentale di valutazione: in particolare verranno considerati gli aspetti relativi alla presentazione dei dati, elaborazione degli stessi, valutazione degli errori sperimentali.
Programma del corso
Lezioni teoriche:
Principi di microscopia ottica lineare e non-lineare. Principali rilevatori per microscopia ottica (sCMOS, EMCCD, fotomoltiplicatori, fotodiodi a quadranti). Cromofori e cenni alla marcatura di campioni biologici.
Introduzione ai setup sperimentali utilizzati in laboratorio. Funzione di trasferimento di un sistema ottico. Moto Browniano e diffusione anomala. Analisi di immagini di microscopia nel dominio spaziale e temporale.
Laboratorio:
Gli studenti verranno guidati nella costruzione di un microscopio ottico a fluorescenza che verrà utilizzato nelle due esperienze di laboratorio. Verranno caratterizzate le principali proprietà del microscopio tra cui la funzione di trasferimento.
I Esperienza: Microscopia di fluorescenza di singole molecole biologiche in cellule viventi. Analisi dei moti diffusivi e anomali e separazione tra moti attivi, diffusivi e confinati.
II Esperienza: Imaging di attività neuronale in larve di pesce zebra tramite sensori fluorescenti sensibili al calcio. Analisi delle proprietà spazio-temporali delle tracce di fluorescenza.